各アプリケーションに特異的な抗体検証：IHC検証済みClaudin-6 mAbの開発

キメラ抗原受容体 (CAR) T細胞や抗体薬物複合体 (ADC)、mRNAワクチン、T細胞リダイレクト二重特異性抗体、細胞活性化二重特異性抗体などの標的免疫療法は、白血病などの血液がんの治療に成功しています。しかし、乳がんや肺がん、膵臓がん、卵巣がん、前立腺がんなどの固形がんを治療する細胞療法の開発は、いまだ難航しています。この種のがんが圧倒的多数を占めているにもかかわらず、2023年現在、固形がんを標的とする遺伝子改変した細胞を用いた治療法はありません。

免疫療法は、特定のマーカーを含む細胞を標的化するように身体の免疫系に教えることで機能します。この治療法における重要なことは、がんに存在し、健康な組織には存在しない細胞マーカーの特定です。適切な分子標的の発見は、新たな治療法の研究開発において科学者が直面する最大の障害の1つです。潜在的な新しい標的が特定されるたびに、その新しい標的の研究に必要な抗体ツールの開発競争が始まります。

さらに、FFPE組織サンプルの免疫組織化学染色 (IHC) 解析は、固形がん研究における重要な要素です。IHCは、実施にあたり抗体の開発が必要となる難しいアプリケーションです。 ウェスタンブロット (WB) や免疫蛍光染色 (IF) などの他の手法とは異なり、IHCに用いる組織サンプルは複雑であり、特殊な調製方法が必要です。そのため、科学者は、特異性と感度が確保された結果を取得するために、IHC用の抗体検証に慎重に取り組むことが求められます。本ブログでは、CSTの優秀な科学者チームが、近年注目されているがん免疫学の有望な創薬標的であるClaudin-6に対するIHC検証済み抗体を、どのように開発したかを紹介します。

Claudin-6 (CLDN6) は、タイトジャンクションタンパク質であるクローディンファミリーのメンバーであり、近年注目されている新たな標的です。胚や胎児の発達過程に発現しますが、成人の組織では通常は発現が抑制されています。しかし、卵巣がんや精巣がん、子宮内膜がんなどのいくつかの上皮がんの細胞表面に再発現します。Claudin-6は、正常な成人の組織では発現が抑制されており、がんに発現していることから、がん免疫研究の良い標的となります。

Claudin-6は、1990年代に発見されましたが、この標的に対する関心が爆発的に高まったのは近年のことです。現在、BioNTech社やXencor社、NovaRock社、Amgen社、I-Mab社、中外製薬株式会社、第一三共株式会社、アッヴィ合同会社が、Claudin-6の治療対象としての可能性を確かめる研究を行っています。

CSTの科学者は、がんにおけるこの有望な標的の機能を探求する初期の研究を追跡し、この標的を研究する研究者が利用できる、Claudin-6に特異的な抗体を同定するための抗体開発キャンペーンを開始しました。特異性と感度の高い抗体を研究に用いることは、その後に続く、正常な組織を標的としない改変T細胞を用いた安全かつ優れた免疫療法の開発に非常に重要です。例えば、Claudin-6は、成人の組織ではほぼ発現していませんが、非常に関連性の高いタンパク質であるClaudin-9 (CLDN9) は、Claudin-6と構造が似ており、全身に高レベルで発現しています。

さらに、優れたClaudin-6抗体には、特異性と感度だけでなく、がん免疫学研究に広く用いられる技術であるIHCアッセイで機能することが求められます。

抗体開発の最終ステップでは、クローンE7U2Oが、Claudin-9などの構造的に類似したタンパク質と交差反応性を示さないことを確認しました。WBとIHCの追加試験を行い、クローンE7U2OがClaudin-6と反応すること、さらにClaudin-6のみに反応することを確認しました。このクローンは、最終的にClaudin-6 (E7U2O) XP^® Rabbit mAb #18932となりました。

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